o 提高濃度滿足后續(xù)需求:在二代測序實驗中,從生物樣本(如血液、組織、細胞等)中提取的核酸濃度可能較低,無法直接用于后續(xù)的文庫構建或其他分析步驟。Auto R3 一體式離心濃縮儀可以快速有效地將核酸溶液中的溶劑蒸發(fā),從而濃縮核酸樣本,使其達到合適的濃度,滿足后續(xù)實驗要求。
o 減少雜質影響:濃縮過程可以在一定程度上減少核酸樣本中的雜質和鹽離子濃度。在核酸提取過程中,可能會殘留一些雜質,這些雜質可能會影響后續(xù)的酶促反應或測序結果。通過濃縮和適當?shù)那逑床襟E,可以降低雜質對實驗的干擾。
o 樣本存儲前處理
o 降低存儲體積:對于需要長期保存的核酸樣本,使用 Auto R3 離心濃縮儀將其濃縮后,可以減少存儲體積,降低存儲成本。較小體積的樣本也更便于管理和運輸。
o 提高樣本穩(wěn)定性:濃縮后的核酸樣本相對更穩(wěn)定,因為減少了溶劑的存在,降低了核酸被氧化、水解等降解的風險,有助于保持核酸的完整性和生物學活性。
文庫構建階段
o 文庫片段濃縮
o 優(yōu)化連接反應:在文庫構建過程中,經(jīng)過片段化、末端修復、加 A 尾和接頭連接等步驟后,文庫片段的濃度可能需要調整。Auto R3 可以濃縮文庫片段,提高連接效率,從而增加文庫的產(chǎn)量和質量。
o 滿足測序上機要求:二代測序儀通常對文庫的濃度和體積有一定要求。通過離心濃縮,能夠使文庫達到測序儀所需的最佳濃度范圍,確保測序反應的順利進行和高質量的數(shù)據(jù)產(chǎn)出。
o 去除反應殘留
o 凈化文庫:文庫構建過程中使用的各種酶和試劑可能會殘留于反應體系中,這些殘留物質可能會對后續(xù)的測序反應產(chǎn)生不利影響。Auto R3 在濃縮文庫的同時,可以去除部分殘留的酶、鹽離子和未反應的接頭等雜質,起到凈化文庫的作用,提高測序數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。